Polyclonal Antibody Production Service
The primary goal of antibody production in laboratory animals is to obtain high titer, high affinity antisera for use in experimentation or diagnostic tests. Adjuvants are used to improve or enhance an immune response to antigens. Most adjuvants provide for an injection site, antigen depot which allows for a slow release of antigen into draining lymph nodes. Many adjuvants also contain or act directly as:
1、surfactants which promote concentration of protein antigens molecules over a large surface area, and
2、immunostimulatory molecules or properties. Adjuvants are generally used with soluble protein antigens to increase antibody titers and induce a prolonged response with accompanying memory.
Such antigens by themselves are generally poor immunogens. Most complex protein antigens induce multiple B-cell clones during the immune response, thus, the response is polyclonal. Immune responses to non-protein antigens are generally poorly or enhanced by adjuvants and there is no system memory.
Procedure
1.Selection of Animal
2. Antigen/Adjuvant Preparation
3. Animal Immune
4. Antiserum Preparation
Delivery Time
-
Service Commitment
- Crnbio guarantee the positive immuned blood. (antigens should be 1-3mg and >0.8mg/ml)
-
多抗服务标准
-
服务标准（小鼠，5只）
-
| 步骤 |
项目周期 |
免疫周期 |
备注 |
| 多肽合成 |
≈2周 |
- |
- |
| 多肽-载体偶联 |
≈3周 |
- |
- |
| 阴性对照血清收集 |
≈4周 |
0天 |
取免疫前血清≈0.1ml |
| 初次免疫 |
≈4周 |
1天 |
每只小鼠腹腔免疫0.1mg多肽-KLH偶联物（加弗氏完全佐剂） |
| 第一次加强免疫 |
≈6周 |
14天 |
每只小鼠腹腔免疫0.1mg多肽-KLH偶联物（加弗氏不完全佐剂） |
| 采血和ELISA检测 |
≈8周 |
24天 |
每只小鼠采集0.01-0.02ml血清，ELISA和初步免疫应答评估 |
| 第二次加强免疫 |
≈9周 |
35天 |
每只小鼠腹腔免疫0.1mg多肽-KLH偶联物（加弗氏不完全佐剂） |
| 采血和ELISA检测 |
≈11周 |
45天 |
每只小鼠采集0.01-0.02ml血清，ELISA和初步免疫应答评估 |
| 第三次加强免疫 |
≈12周 |
56天 |
每只小鼠腹腔免疫0.1mg多肽-KLH偶联物（加弗氏不完全佐剂） |
| 收集血清 |
≈14周 |
66天 |
每只小鼠采集0.5ml血清 |
| ELISA检测和交付 |
≈15周 |
80天 |
终止项目或进一步制备 |
-
服务标准（大鼠，3只）
-
| 步骤 |
项目周期 |
免疫周期 |
备注 |
| 多肽合成 |
≈2周 |
- |
- |
| 多肽-载体偶联 |
≈3周 |
- |
- |
| 阴性对照血清收集 |
≈4周 |
0天 |
取免疫前血清≈0.1ml |
| 初次免疫 |
≈4周 |
1天 |
每只大鼠腹腔免疫0.1mg多肽-KLH偶联物（加弗氏完全佐剂） |
| 第一次加强免疫 |
≈6周 |
14天 |
每只大鼠腹腔免疫0.1mg多肽-KLH偶联物（加弗氏不完全佐剂） |
| 采血和ELISA检测 |
≈8周 |
24天 |
每只大鼠采集0.01-0.02ml血清，ELISA和初步免疫应答评估 |
| 第二次加强免疫 |
≈9周 |
35天 |
每只大鼠腹腔免疫0.1mg多肽-KLH偶联物（加弗氏不完全佐剂） |
| 采血和ELISA检测 |
≈11周 |
45天 |
每只大鼠采集0.01-0.02ml血清，ELISA和初步免疫应答评估 |
| 第三次加强免疫 |
≈12周 |
56天 |
每只大鼠腹腔免疫0.1mg多肽-KLH偶联物（加弗氏不完全佐剂） |
| 收集血清 |
≈14周 |
66天 |
每只大鼠采集1.5～2ml血清 |
| ELISA检测和交付 |
≈15周 |
80天 |
终止项目或进一步制备 |
-
服务标准（兔，2只）
-
| 步骤 |
项目周期 |
免疫周期 |
备注 |
| 多肽合成 |
≈2周 |
- |
- |
| 多肽-载体偶联 |
≈3周 |
- |
- |
| 阴性对照血清收集 |
≈4周 |
0天 |
取免疫前血清≈2~3ml |
| 初次免疫 |
≈4周 |
1天 |
每只兔子皮下免疫0.5mg多肽-KLH偶联物（加弗氏完全佐剂） |
| 第一次加强免疫 |
≈6周 |
14天 |
每只兔子皮下免疫0.5mg多肽-KLH偶联物（加弗氏不完全佐剂） |
| 采血和ELISA检测 |
≈8周 |
24天 |
每只兔子采集100μl血清，ELISA和初步免疫应答评估 |
| 第二次加强免疫 |
≈9周 |
35天 |
每只兔子皮下免疫0.5mg多肽-KLH偶联物（加弗氏不完全佐剂） |
| 收集血清 |
≈11周 |
45天 |
每只兔子采集10~20ml血清 |
| 第三次加强免疫 |
≈12周 |
56天 |
每只兔子皮下免疫0.5mg多肽-KLH偶联物（加弗氏不完全佐剂） |
| 收集血清 |
≈14周 |
70天 |
每只兔子采集40ml血清 |
| ELISA检测和交付 |
≈15周 |
80天 |
终止项目或进一步制备 |
-
服务标准（羊，2只）
-
| 步骤 |
项目周期 |
免疫周期 |
备注 |
| 多肽合成 |
≈2周 |
- |
- |
| 多肽-载体偶联 |
≈3周 |
- |
- |
| 阴性对照血清收集 |
≈4周 |
0天 |
取免疫前血清≈5ml |
| 初次免疫 |
≈4周 |
1天 |
每只羊皮下免疫0.5mg多肽-KLH偶联物（加弗氏完全佐剂） |
| 第一次加强免疫 |
≈6周 |
14天 |
每只羊皮下免疫0.5mg多肽-KLH偶联物（加弗氏不完全佐剂） |
| 采血和ELISA检测 |
≈8周 |
24天 |
每只羊采集2ml血清，ELISA检测和初步免疫应答评估 |
| 第二次加强免疫 |
≈9周 |
35天 |
每只羊皮下免疫0.5mg多肽-KLH偶联物（加弗氏不完全佐剂） |
| 收集血清 |
≈11周 |
45天 |
每只羊采集50-100ml血清 |
| 第三次加强免疫 |
≈12周 |
56天 |
每只羊皮下免疫0.5mg多肽-KLH偶联物（加弗氏不完全佐剂） |
| 收集血清 |
≈14周 |
66天 |
每只羊采集500ml血清 |
| ELISA检测和交付 |
≈15周 |
72天 |
终止项目或进一步制备 |
-
服务标准（鸡，2只）
-
| 步骤 |
项目周期 |
免疫周期 |
备注 |
| 多肽合成 |
≈2周 |
- |
- |
| 多肽-载体偶联 |
≈3周 |
- |
- |
| 阴性对照血清收集 |
≈4周 |
0天 |
取免疫前血清≈2ml |
| 初次免疫 |
≈4周 |
1天 |
每只鸡皮下免疫0.1mg多肽-KLH偶联物（加弗氏完全佐剂） |
| 第一次加强免疫 |
≈6周 |
14天 |
每只鸡皮下免疫0.1mg多肽-KLH偶联物（加弗氏不完全佐剂） |
| 采血和ELISA检测 |
≈7周 |
24天 |
采血，ELISA检测和初步免疫应答评估 |
| 第二次加强免疫 |
≈9周 |
35天 |
每只鸡皮下免疫0.1mg多肽-KLH偶联物（加弗氏不完全佐剂） |
| 收集抗体和ELISA检测 |
≈10周 |
45天 |
每只鸡采集1ml血清，鸡蛋搜集1周 |
| 第三次加强免疫 |
≈12周 |
56天 |
每只鸡皮下免疫0.1mg多肽-KLH偶联物（加弗氏不完全佐剂） |
| 收集血清 |
≈13周 |
63天 |
鸡蛋搜集1周 |
| ELISA检测和交付 |
≈15周 |
80天 |
终止项目或进一步制备 |
-
常用案例（兔）
-
抗肽多克隆抗血清制备（卡诺瑞合成抗原）
-
| 服务内容 |
交付 |
周期 |
a.多肽合成（少于15个氨基酸，纯度大于85%，10mg）
b.C末段或N末段半胱氨酸偶联KLH
c.两只新西兰大白兔，每只均经过四次免疫
d.100~120ml抗血清
e.ELISA测试 |
A.1ml免疫前血清
B.ELISA结果
C.100~120ml抗血清
D.5mg未偶联多肽，MS和PLC报告 |
多肽合成:2~3周
偶联:1周
免疫:10周
ELISA和运输:1~2周
总计:14~16周 |
-
抗原亲和纯化多克隆抗体制备（客户提供抗原）
-
| 服务 |
多肽抗原 |
蛋白抗原 |
| 服务内容 |
a.偶联KLH
b.两只新西兰大白兔，每只均经过四次免疫
c.最终采血
d.多肽偶联亲和树脂
e.亲和纯化
f.ELISA检测
g.客户提供抗原：7.5~8mg多肽（2.5~3mg用于免疫, 5mg用于纯化） |
a.SDS-PAGE核查蛋白
b.两只新西兰大白兔，每只均经过四次免疫
c.最终采血
d.蛋白偶联亲和树脂（如有需要可用PBS透析）
e.亲和纯化
f.ELISA检测
g.客户提供抗原：7.5~8mg蛋白（2.5~3mg用于免疫，5mg用于纯化）浓度>0.4 mg/ml,缓冲液中不含有机溶剂，不要用Tris或其它含氨基的缓冲液 |
| 交付 |
A.1ml免疫前血清
B.ELISA结果
C.3~5mg纯化抗体
D.剩余抗原 |
A.1ml免疫前血清
B.ELISA结果
C.3~5mg纯化抗体
D.剩余抗原 |
| 周期 |
偶联:1周
免疫:10周
纯化:1周
ELISA和运输:1~2周
总计:13~14周 |
蛋白核查:1周
免疫:10周
纯化:1周
ELISA和运输:1~2周
总计:13~14周 |
-
Protein A亲和纯化多克隆抗体制备（客户提供抗原）
-
| 服务内容 |
交付 |
周期 |
a.偶联KLH（可选）
b.两只新西兰大白兔，每只均经过四次免疫
c.最终采血
d.Protein A纯化
e.ELISA测试
f.客户提供抗原：2.5~3mg多肽或蛋白，浓度需 >0.4mg/ml |
A.1ml免疫前血清
B.ELISA结果
C.200~500mg Protein A纯化抗体
D.剩余抗原 |
偶联:1周
免疫:10周
纯化:1周
ELISA和运输:1~2周
总计:13~14周 |
-
多克隆抗血清制备
-
| 服务内容 |
交付 |
周期 |
a.偶联KLH（可选）
b.两只新西兰大白兔，每只均经过四次免疫
c.100~120ml抗血清
d.ELISA检测
e.如果客户提供抗原：3~5mg多肽或蛋白，浓度需大于0.4mg/ml |
A.1ml免疫前血清
B.ELISA结果
C.100~200ml抗血清 |
偶联:1周
免疫:10周
ELISA和运输:1~2周
总计:12~13周 |
-
抗原亲和纯化多克隆抗体制备（卡诺瑞合成抗原）
-
| 服务内容 |
交付 |
周期 |
a.多肽合成
b.C末段或N末段半胱氨酸偶联KLH
c.两只新西兰大白兔，每只均经过四次免疫
d.最终采血
e.偶联多肽(5mg)到亲和树脂上
f.亲和纯化
g.ELISA测试 |
A.1ml免疫前血清
B.ELISA结果
C.3~5mg亲和纯化抗体
D.5mg未偶联多肽，MS和HPLC报告 |
多肽合成:2~3周
偶联:1周
免疫:10周
纯化:1周
ELISA和运输:1~2周
总计:15~17周 |
-
Protein A亲和纯化多克隆抗体制备（卡诺瑞合成抗原）
-
| 服务内容 |
交付 |
周期 |
a.多肽合成（少于15个氨基酸，纯度大于85%，10mg）
b.C末段或N末段半胱氨酸偶联KLH
c.两只新西兰大白兔，每只均经过四次免疫
d.最终采血
e.Protein A纯化抗血清
f.ELISA测试 |
A.1ml免疫前血清
B.ELISA结果
C.200~500mg Protein A纯化抗体
D.5mg未偶联多肽，MS和HPLC报告 |
多肽合成:2~3周
偶联:1周
免疫:10周
纯化:1周
ELISA和运输:1~2周
总计:15~17周 |
-
磷酸化多克隆抗体制备（卡诺瑞合成抗原）
-
| 服务内容 |
交付 |
周期 |
a.多肽合成，一条带有氨基酸修饰（少于15个氨基酸，纯度大于90%，15mg），另一条不带有上述修饰氨基酸（少于15个氨基酸，纯度大于70%，10mg）
b.C末段或N末段半胱氨酸偶联KLH
c.两只新西兰大白兔，每只均经过四次免疫
d.100~120ml兔血
e.亲合纯化
f.ELISA测试 |
A.1ml免疫前血清
B.ELISA结果
C.1~3mg特殊修饰的抗体
D.5mg修饰多肽，5mg未修饰多肽，MS和HPLC报告 |
多肽合成:2~4周
偶联:1周
免疫:10周
纯化:1周
ELISA和运输:1~2周
总计:15~18周 | |
