首页 | 产品信息 | 技术研发 | 常规服务 | 订单下载 | 访客留言 | 联系我们  
 技术研发分类 
· 蛋白定制服务
· 抗体定制服务
· 试剂盒定制服务
· 课题项目服务
 产品分类 
· 蛋白相关
·重组蛋白;
·蛋白提取试剂盒;
·蛋白定量试剂盒;
·蛋白纯化试剂;
·细胞培养添加蛋白因子;
·蛋白Marker
· 核酸相关
·吸附柱法核酸提取试剂盒;
·磁珠法核酸提取试剂盒
·免核酸提取样品保存液/核酸释放剂;
·核酸采集与保护套装;
·一次性病毒采样管套装;
·一步法新型冠状病毒荧光定量PCR试剂盒
·表达质粒
· 试剂盒相关
·ELISA 试剂盒;
·细胞凋亡检测试剂盒;
·细胞转染试剂;
·ECL高灵敏度化学发光试剂盒
· 抗体相关
·一抗;
·二抗;
·体外诊断(IVD)活性抗体;
·抗体纯化试剂
· 一次性制药系统
·2D储液袋;
·3D储液袋;
·磁力搅拌袋;
·配液系统
· CDMO服务
·细胞株开发;
·细胞培养工艺开发;
·蛋白纯化工艺开发;
·制剂工艺开发;
·中试放大生产;
·GMP生产服务
技术研发 >> 蛋白定制服务
重组蛋白酵母表达服务;

重组蛋白酵母表达服务

诺梵生物多年致力于重组蛋白表达与制备研究。我们的科学家拥有丰富的酵母(Yeast)蛋白重组表达、发酵和纯化经验,能够快速为不同客户定制蛋白酵母表达策略。

蛋白酵母表达系统兼具部分原核蛋白表达特征(培养条件简单、生长速度快、表达水平高、操作简便)和部分真核蛋白表达特征(蛋白翻译后能进行正确加工、修饰,合理的空间折叠)。重组蛋白酵母表达系统的优势主要表现在以下几个方面:重组蛋白既可以分泌形式又可以非分泌形式在酵母系统中表达,且能高水平表达,达到5g/L;外源蛋白基因可以以整合的方式插入到酵母染色体上,随染色体复制而不会丢失;酵母具有真核生物的亚细胞结构,具有糖基化、脂肪酰化、蛋白磷酸化等翻译后修饰加工功能,适合活性蛋白表达;容易实现超高密度发酵,卡梅德生物能同时为客户提供多种规格的蛋白酵母发酵规模,如500L发酵罐,配合我们的蛋白纯化平台,能够在较短周期内获得高质量的重组蛋白产品。

蛋白酵母分泌表达步骤与周期 

 

步骤

服务内容

周期

酵母表达载体亚克隆

*密码子优化,基因合成(或客户提供质粒模板:目的基因扩增)

*将目标基因亚克隆到合适的表达质粒上,可提供表达载体,如pPICZaA 、pGAPZaA、pPIC9K

*拼接序列验证:测序

*交付:正确构建的重组表达质粒,含重组质粒的DH5α菌株及测序原始报告

1-2周

酵母表达菌株转化

*可提供表达菌株:X33,GS115,酿酒酵母等。

*扩增培养5-10个阳性克隆并进行重组蛋白诱导表达

*SDS-PAGE交付:阳性克隆菌株及表达筛选结果报告。

2周

酵母表达菌株筛选

*检测重组蛋白表达情况(适用于多拷贝数和高表达菌株)

*交付:阳性克隆菌株及表达筛选结果报告。

2周

酵母表达菌株表达优化

对挑选出来的单克隆菌株,优化培养及诱导条件(培养基,菌体密度,甲醇浓度,诱导时间等),提高目标蛋白的表达量

2周

小规模蛋白表达及纯化

*1L发酵液通过亲和,离子交换,疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。

*SDS-PAGE交付:重组蛋白0.02-3mg及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签(Tag)或切除纯化标签(Tag)的最终蛋白,纯度>85%。

2-3周

大规模蛋白表达及纯化

10L,30L,80L,130L,500L发酵规模


增值服务

*通过HPLC,质谱等方法详细检测目标蛋白的质量。

*蛋白质N端测序:PPSQ31(Edman降解法测序仪)

1-2周

 

服务优势

--密码子优化:包含稀有密码子分析,蛋白亲水性分析和跨膜结构域的预测分析

--分泌蛋白表达,接近天然构象的重组蛋白

--多种规模蛋白发酵模式:小规模(500ml、10L)和大规模(80L、130L、250L和500L发酵罐)

--高纯度毫克级,克级重组蛋白;稳定的批间一致性

--低内毒素:LAL检测法<0.1EU/ug

--完整的GMP文件支撑体系,保证实验信息可追溯

上一篇:重组蛋白GMP生产服务;    下一篇:稳定细胞系构建服务;
关于我们   |   诚聘英才   |   信息发布   |   新品推荐   |   技术支持

电话:400-832-8698,010-60630259       地址:北京怀柔雁栖开发区光织谷东区二号楼 

   备案/许可证编号京ICP备2020036913号

京ICP备2020036913号    技术支持:华大网络