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组织或细胞全蛋白抽提试剂盒

产品简介

 本产品应用于组织样本或细胞的总蛋白提取。使用该提取液提取的组织蛋白,可进行蛋白活性分析、免疫检测、蛋白纯化等下游操作。 试剂盒中带有蛋白酶抑制剂混合物,可有效避免蛋白提取过程中蛋白的降解。

注意事项

1.本产品适用于提取心肌、骨骼肌、肾脏、前列腺、皮肤、结肠、肝脏等软组织或细胞。

2.为防止蛋白降解,所有的操作尽量在冰上进行。

3.为了获得实验最佳效果,请根据实验调整最佳使用量。

主要组成成分

产品编号

组分

体积

储存条件

1

Buffer A(裂解液)

50ml

-20℃

2

Buffer B(蛋白酶抑制剂)

500ul

-20℃

3

Buffer C(磷酸酶抑制剂)

500ul

-20℃

4

说明书

1份

/

产品使用说明

1.组织样本的处理

a.取待测组织样本,用预冷的PBS(0.01 M,pH=7.4)充分洗涤,洗去组织表面血液及内部杂物。

b.称重剪碎,加入适量比例的Buffer A混合物(1 mL的Buffer A中加入10 ul Buffer B和10 ul Buffer C)进行匀浆裂解。建议按组织重量:Buffer A体积=3:10的比例匀浆,例如0.3 g的组织样本加入1 mL的Buffer A,具体体积可根据实验需要适当调整。

c.匀浆后冰上震荡裂解30 min。

d.在35~40%的功率下,超声处理样本1 min(冰浴条件下进行),超声2 s,间隔2 s,确保细胞充分裂解,降低样本粘度。

e.4°C下12,000 rpm离心10 min,取上清,待测定蛋白浓度。可以选购本公司试剂盒进行蛋白浓度测定。

2.细胞样本处理

a.收集待测细胞样本,用预冷的PBS(0.01 M,pH=7.4)充分洗涤,洗去培养基等成分(一般建议洗涤3次)。

b.加入适量比例的Buffer A混合物(1 mL的Buffer A中加入10 ul Buffer B和10 ul Buffer C)进行冰上裂解30 min。建议6孔板中每孔加入0.1 mL Buffer A(细胞中的蛋白含量可能会不同,可适当调整加入裂解液的体积)。

c.在35~40%的功率下,超声处理样本1 min(冰浴条件下进行),超声2 s,间隔2 s,确保细胞充分裂解,降低样本粘度。

d.4°C 下12,000 rpm离心10 min,取上清,待测定蛋白浓度。可以选购本公司试剂盒进行蛋白浓度测定。

   说明书:组织或细胞全蛋白抽提试剂盒

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