产品介绍

试剂盒适用于从酵母中提取高纯度RNA。本试剂盒采用独特的试剂配方和特别制造的固相吸附介质。在试剂配方中避免使用苯酚、氯仿等有毒有害化学物质，对操作人员、实验环境无毒害影响。在产品独有的缓冲液体系的作用下，酵母RNA从菌体中快速释放，吸附于高性能的固相基质，洗脱后即可获得高纯度核糖核酸。产品具有操作快速简便、提取的核糖核酸纯度高、得率高等优点。

存储和稳定性

试剂盒储存在环境温度-40℃~40℃，相对湿度不大于75%，无腐蚀性气体的避光处。

本品保质期为36 个月。

包装清单

使用前准备

准备好所有必须的试剂和仪器，仔细阅读说明书。

每瓶溶液Ⅳ和Ⅴ在首次使用前按瓶子标签标示量加入无水乙醇并摇匀。

每个离心柱的最大可吸附约100μg RNA。

全部操作都在室温进行。

操作步骤

1. 在合适的培养基，合适的温度中过夜培养酵母菌。第二天，按1:50接种并培养至OD600达0.6‐1.0。这可能只需要几小时。

2. 取1ml 以上培养物，14,000 x g离心2分钟。

3. 将沉淀重悬在100ul溶液I中。

可选用：溶液I中加入β-巯基乙醇至终浓度为0.1%。含β-巯基乙醇的溶液I 4℃可保存1个月，过期请重新添加。

4. 30℃孵育15‐30分钟直到溶液看起来清亮。

5. 加入75ul溶液II，轻轻混合。

6. 加入350ul溶液III颠倒混匀，在小型离心机中最高速离心10分钟。

7. 用移液枪将上清转移到一支新离心管中。

8. 向澄清裂解液中加入200ul无水乙醇，用移液枪吸放3‐4次以混合。将此混合物转移到离心柱中。12,000‐14,000 x g离心1分钟。

9. 向离心柱中加入500ul溶液IV (确认已加入乙醇)，12,000‐14,000 x g离心1分钟，清空收集管。

10. 加入500 ul溶液Ⅴ（确认已加入乙醇），离心12,000‐14,000 x g，2分钟。

11.将离心柱取出并放入新的1.5ml离心管中。向柱中加入溶液Ⅵ40_~60μl，静置2_~3 min。最高转速（12000g或13000rpm以上）离心1min。RNA即从离心柱上洗脱并收集在离心管中。盖好盛有RNA的洗脱管，存于‐70℃。

说明书：酵母总RNA提取试剂盒说明书