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​植物组织总RNA提取试剂盒

包装清单

产品编号

产品名称

包装

1

溶液I(裂解液)

30 mL

2

溶液II(洗涤液1)

12mL(用前加入18ml的无水乙醇)

3

溶液III(洗涤液2)

12mL(用前加入18ml的无水乙醇)

4

溶液IV(洗脱液)

10mL

5

纯化柱

50个

6

废液收集管

50个

7

说明书

1份

产品介绍

植物组织总RNA提取试剂盒用于植物组织如叶、花中总RNA提取纯化。它的特点是操作简单、快速。使用试剂盒1小时内即可获得产物,并且获得物纯度高,不含核酸酶,因而远比传统的有机溶剂抽提沉淀方法获得的RNA稳定。这使RNA提取工作变得非常容易,得到的总RNA可以用于Northern Blot,RT-PCR,MicroArray和Real-Time PCR。

存储和稳定性

试剂盒储存在环境温度-40℃~40℃,相对湿度不大于75%,无腐蚀性气体的避光处。

保质期:36个月。

使用前准备

1. 阅读说明书,备好必需的试剂和仪器。自备试剂和耗材:无水乙醇、β-巯基乙醇(可选择)、合适的离心管(1.5ml或2ml)。全部离心均室温进行。

2. 溶液II和III在首次使用前加入18ml无水乙醇,摇匀后标记备用。

操作步骤

1.取100mg植物组织,液氮快速研磨成粉末,不待其溶化立即加入500μl溶液I,涡旋振荡混匀。

注:1)、100mg为参考值。由于不同样本、不同部位的核酸含量可相差数十倍,实验前请查阅相关资料确定样本种类、部位及材料使用量。最佳材料为新鲜且生长旺盛的幼嫩组织。植物样本重和溶液RB 体积比为1:5左右。

2)、可选用:溶液I中加入β-巯基乙醇至终浓度为1%。含β-巯基乙醇的溶液I 4℃可保存1个月,过期请重新添加。

2.将匀浆转移至离心管(自备)中,最高转速(12000g或13000rpm以上)离心3~5 min。

3.用移液枪将上清转移到一支新离心管中,加入1/2体积溶液I的无水乙醇,如500ul溶液I则加入250ul的无水乙醇。

4.而后转入套有收集管的离心柱中,最高转速(12000g或13000rpm以上)离心1 min。

5.取出并弃去收集管中的离心柱,向收集管内液体加入其1/2体积的无水乙醇(如:收集管中含500μl液体,则加入250μl无水乙醇),充分混匀。

6.将液体移入新的套有收集管的离心柱中,最高转速(12000g或13000rpm 以上)离心1min。取出离心柱后弃去收集管中废液,将离心柱放回收集管。

7.向离心柱中加入500μl溶液II。最高转速(12000g或13000rpm以上)离心30sec,取出离心柱后弃去收集管中废液,将离心柱放回。

8.向离心柱中加入500μl溶液III。最高转速(12000g或13000rpm以上)离心30sec,取出离心柱后弃去收集管中废液,将离心柱放回。

9.最高转速(12000g或13000rpm以上)离心2min。

10.将离心柱取出并放入新的1.5ml离心管中。向柱中加入溶液V40~60μl,静置2~3 min。最高转速(12000g或13000rpm以上)离心1min。RNA即从离心柱上洗脱并收集在离心管中。存于‐70℃。

说明书:植物组织总RNA提取试剂盒说明书

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