产品简介

　本产品应用于组织样本或细胞的总蛋白提取。使用该提取液提取的组织蛋白，可进行蛋白活性分析、免疫检测、蛋白纯化等下游操作。 试剂盒中带有蛋白酶抑制剂混合物，可有效避免蛋白提取过程中蛋白的降解。

注意事项

1．本产品适用于提取心肌、骨骼肌、肾脏、前列腺、皮肤、结肠、肝脏等软组织或细胞。

2．为防止蛋白降解，所有的操作尽量在冰上进行。

3．为了获得实验最佳效果，请根据实验调整最佳使用量。

主要组成成分

产品使用说明

1.组织样本的处理

a.取待测组织样本，用预冷的PBS（0.01 M，pH=7.4）充分洗涤，洗去组织表面血液及内部杂物。

b.称重剪碎，加入适量比例的Buffer A混合物（1 mL的Buffer A中加入10 ul Buffer B和10 ul Buffer C）进行匀浆裂解。建议按组织重量：Buffer A体积=3:10的比例匀浆，例如0.3 g的组织样本加入1 mL的Buffer A，具体体积可根据实验需要适当调整。

c.匀浆后冰上震荡裂解30 min。

d.在35~40％的功率下，超声处理样本1 min（冰浴条件下进行），超声2 s，间隔2 s，确保细胞充分裂解，降低样本粘度。

e.4°C下12,000 rpm离心10 min，取上清，待测定蛋白浓度。可以选购本公司试剂盒进行蛋白浓度测定。

2.细胞样本处理

a.收集待测细胞样本，用预冷的PBS（0.01 M，pH=7.4）充分洗涤，洗去培养基等成分（一般建议洗涤3次）。

b.加入适量比例的Buffer A混合物（1 mL的Buffer A中加入10 ul Buffer B和10 ul Buffer C）进行冰上裂解30 min。建议6孔板中每孔加入0.1 mL Buffer A（细胞中的蛋白含量可能会不同，可适当调整加入裂解液的体积）。

c.在35~40％的功率下，超声处理样本1 min（冰浴条件下进行），超声2 s，间隔2 s，确保细胞充分裂解，降低样本粘度。

d.4°C 下12,000 rpm离心10 min，取上清，待测定蛋白浓度。可以选购本公司试剂盒进行蛋白浓度测定。

   说明书：组织或细胞全蛋白抽提试剂盒