产品介绍 试剂盒适用于从酵母中提取高纯度RNA。本试剂盒采用独特的试剂配方和特别制造的固相吸附介质。在试剂配方中避免使用苯酚、氯仿等有毒有害化学物质，对操作人员、实验环境无毒害影响。在产品独有的缓冲液体系的作用下，酵母RNA从菌体中快速释放，吸附于高性能的固相基质，洗脱后即可获得高纯度核糖核酸。产品具有操作快速简便、提取的核糖核酸纯度高、得率高等优点。 存储和稳定性 试剂盒储存在环境温度-40℃~40℃，相对湿度不大于75%，无腐蚀性气体的避光处。 本品保质期为36 个月。 包装清单 产品编号 | 产品名称 | 包装 | 1 | 溶液I（悬浮液） | 10 ml | 2 | 溶液II（裂解液） | 10 ml | 3 | 溶液III (稀释液) | 30 mL | 4 | 溶液Ⅳ(洗涤液1) | 12mL（用前加入18ml的无水乙醇） | 5 | 溶液Ⅴ(洗涤液2) | 12mL（用前加入18ml的无水乙醇） | 6 | 溶液Ⅵ(洗脱液) | 10mL | 7 | 纯化柱 | 50个 | 8 | 废液收集管 | 50个 | 9 | 说明书 | 1份 |
使用前准备 准备好所有必须的试剂和仪器，仔细阅读说明书。 每瓶溶液Ⅳ和Ⅴ在首次使用前按瓶子标签标示量加入无水乙醇并摇匀。 每个离心柱的最大可吸附约100μg RNA。 全部操作都在室温进行。 操作步骤 1. 在合适的培养基，合适的温度中过夜培养酵母菌。第二天，按1:50接种并培养至OD600达0.6‐1.0。这可能只需要几小时。 2. 取1ml 以上培养物，14,000 x g离心2分钟。 3. 将沉淀重悬在100ul溶液I中。 可选用：溶液I中加入β-巯基乙醇至终浓度为0.1%。含β-巯基乙醇的溶液I 4℃可保存1个月，过期请重新添加。 4. 30℃孵育15‐30分钟直到溶液看起来清亮。 5. 加入75ul溶液II，轻轻混合。 6. 加入350ul溶液III颠倒混匀，在小型离心机中最高速离心10分钟。 7. 用移液枪将上清转移到一支新离心管中。 8. 向澄清裂解液中加入200ul无水乙醇，用移液枪吸放3‐4次以混合。将此混合物转移到离心柱中。12,000‐14,000 x g离心1分钟。 9. 向离心柱中加入500ul溶液IV (确认已加入乙醇)，12,000‐14,000 x g离心1分钟，清空收集管。 10. 加入500 ul溶液Ⅴ（确认已加入乙醇），离心12,000‐14,000 x g，2分钟。 11.将离心柱取出并放入新的1.5ml离心管中。向柱中加入溶液Ⅵ40~60μl，静置2~3 min。最高转速（12000g或13000rpm以上）离心1min。RNA即从离心柱上洗脱并收集在离心管中。盖好盛有RNA的洗脱管，存于‐70℃。 说明书：酵母总RNA提取试剂盒说明书 |
