包装清单 产品编号 | 产品名称 | 包装 | 1 | 溶液I(裂解液) | 30 mL | 2 | 溶液II(洗涤液1) | 12mL（用前加入18ml的无水乙醇） | 3 | 溶液III(洗涤液2) | 12mL（用前加入18ml的无水乙醇） | 4 | 溶液IV(洗脱液) | 10mL | 5 | 纯化柱 | 50个 | 6 | 废液收集管 | 50个 | 7 | 说明书 | 1份 |
产品介绍 植物组织总RNA提取试剂盒用于植物组织如叶、花中总RNA提取纯化。它的特点是操作简单、快速。使用试剂盒1小时内即可获得产物，并且获得物纯度高，不含核酸酶，因而远比传统的有机溶剂抽提沉淀方法获得的RNA稳定。这使RNA提取工作变得非常容易，得到的总RNA可以用于Northern Blot，RT-PCR，MicroArray和Real-Time PCR。 存储和稳定性 试剂盒储存在环境温度-40℃~40℃，相对湿度不大于75%，无腐蚀性气体的避光处。 保质期：36个月。 使用前准备 1. 阅读说明书，备好必需的试剂和仪器。自备试剂和耗材：无水乙醇、β-巯基乙醇(可选择)、合适的离心管（1.5ml或2ml）。全部离心均室温进行。 2. 溶液II和III在首次使用前加入18ml无水乙醇，摇匀后标记备用。 操作步骤 1.取100mg植物组织，液氮快速研磨成粉末，不待其溶化立即加入500μl溶液I，涡旋振荡混匀。 注：1）、100mg为参考值。由于不同样本、不同部位的核酸含量可相差数十倍，实验前请查阅相关资料确定样本种类、部位及材料使用量。最佳材料为新鲜且生长旺盛的幼嫩组织。植物样本重和溶液RB 体积比为1:5左右。 2）、可选用：溶液I中加入β-巯基乙醇至终浓度为1%。含β-巯基乙醇的溶液I 4℃可保存1个月，过期请重新添加。 2.将匀浆转移至离心管（自备）中，最高转速（12000g或13000rpm以上）离心3~5 min。 3.用移液枪将上清转移到一支新离心管中，加入1/2体积溶液I的无水乙醇，如500ul溶液I则加入250ul的无水乙醇。 4.而后转入套有收集管的离心柱中，最高转速（12000g或13000rpm以上）离心1 min。 5.取出并弃去收集管中的离心柱，向收集管内液体加入其1/2体积的无水乙醇（如：收集管中含500μl液体，则加入250μl无水乙醇），充分混匀。 6.将液体移入新的套有收集管的离心柱中，最高转速（12000g或13000rpm 以上）离心1min。取出离心柱后弃去收集管中废液，将离心柱放回收集管。 7.向离心柱中加入500μl溶液II。最高转速（12000g或13000rpm以上）离心30sec，取出离心柱后弃去收集管中废液，将离心柱放回。 8.向离心柱中加入500μl溶液III。最高转速（12000g或13000rpm以上）离心30sec，取出离心柱后弃去收集管中废液，将离心柱放回。 9.最高转速（12000g或13000rpm以上）离心2min。 10.将离心柱取出并放入新的1.5ml离心管中。向柱中加入溶液V40~60μl，静置2~3 min。最高转速（12000g或13000rpm以上）离心1min。RNA即从离心柱上洗脱并收集在离心管中。存于‐70℃。 说明书：植物组织总RNA提取试剂盒说明书 |
