核酸产物胶体金试纸条 【核酸检测原理】本产品用胶体金双抗体夹心法检测,试纸条利用Biotin单克隆抗体进行胶体金标记捕获扩增产物,检测线上包被FITC/TAMRA单克隆抗体,当待检样品里有生物素和FITC/TAMRA修饰的目标检测物时会与金标抗体结合进而与NC膜上抗体结合形成 金标抗体—目标检测物—抗体 的复合物,从而被肉眼辨别为一条红线,即阳性。如果没有红色线出现则为阴性。 【主要组成部分】 PVC底板,硝酸纤维膜、玻纤及滤纸块组成。 【有效期】 有效期为6个月 【储存条件】 将试纸条存放在密封的容器中,在干燥、避光以及阴凉的环境(2~8℃)中保存。不要扔掉干燥剂。避免将试纸条暴露于日光下或潮湿、温度升高、具有化学气体的环境中。在适当条件下存放时,试纸条在指定有效期内的性能是稳定的,即使开启后亦如此。请不要触摸测试块。 【使用须知】 1、试纸为一次性用品,不可重复使用; 2、铝箔复合包装内有干燥剂,不得服用; 3、拆开试纸后请尽快使用; 4、如试纸条变色,请勿使用; 5、应在项目规定时间内判断结果; 6、请勿用手直接触摸试纸部分,以免污染; 7、本产品仅供科研用。 【检测方法】 1.取待测物上清用于检测,用样品稀释液稀释样品,稀释倍数根据目标物浓度确定; 2.取出试纸条放于水平桌面上(尽快使用),注意不要触碰NC膜; 3.用移液枪或滴管吸取80ul待检样品缓慢逐滴滴加在试纸条加样孔上,如图1。7-10分钟判读结果。 【结果判读】 现象 | 结果 | 1.控制带与检测带都出现明显的红线 注意: ①检测带弱染色也视为阳性结果。 ②阳性结果可能在1-2分钟内可见。 ③在杂交产物浓度很高的情况下,控制带的强度可能会受到影响。尽管如此,控制带仍应清晰可见 | 阳性 | 2.只有控制带出现红线 | 阴性 | 3.控制带没有出现红线 | 无效 |
【常见问题解析】
问题 | 可能原因 | 解决方法 | C线不明显 | ①缓冲液问题 ②试纸条过期 ③试纸条存放条件不当 | ①更换缓冲液 ②试纸条保质期为6个月 ③试纸条密封干燥避光保存(2-8℃) | 试纸条阴性但是琼脂糖凝胶电泳有条带 | ①琼脂糖凝胶中检测到非特异性PCR产物 | ①用Southern杂交法检测PCR产物的序列 | 假阳性 | ①器皿或缓冲液污染 ②选用的缓冲液PH或者离子强度是否合适 | ①更换新的器皿 ②选用PH值与离子强度合适的缓冲液 |
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