CRISPR核酸产物胶体金试纸条【CRISPR免疫层析检测原理】为便于现场可视化检测, Cas12a免疫层析检测系统,使用了FAM(FITC) -生物素报告基因进行免疫层析检测。阴性样品中,金粒抗生物素抗体与高浓度FAM(FITC) -生物素报告基因充分结合,结合物在对照Control条带被抗FAM(FITC)抗体拦截。对于阳性样本,FAM(FITC) -生物素报告基因被裂解,金粒抗生物素抗体的偶联物在检测条带积累,而在对照条带积累减少。免疫层析检测的原理图如图a所示。
【主要组成部分】 PVC底板,硝酸纤维膜、玻纤及滤纸块组成。 【有效期】 有效期为6个月。 【储存条件】 将试纸条存放在密封的容器中,在干燥、避光以及阴凉的环境(2~8℃)中保存。不要扔掉干燥剂。避免将试纸条暴露于日光下或潮湿、温度升高、具有化学气体的环境中。在适当条件下存放时,试纸条在指定有效期内的性能是稳定的,即使开启后亦如此。请不要触摸测试块。 【使用须知】 1、试纸为一次性用品,不可重复使用; 2、铝箔复合包装内有干燥剂,不得服用; 3、拆开试纸后请尽快使用; 4、如试纸条变色,请勿使用; 5、应在项目规定时间内判断结果; 6、请勿用手直接触摸试纸部分,以免污染; 7、本产品仅供科研用。 【检测方法】 1.取待测物上清用于检测,用样品稀释液稀释样品,稀释倍数根据目标物浓度确定; 2.取出试纸条放于水平桌面上(尽快使用),注意不要触碰NC膜; 3.用移液枪或滴管吸取80ul待检样品缓慢逐滴滴加在试纸条加样孔上,如图1。7-10分钟判读结果。
【结果判读】
现象 | 结果 | 1.控制带与检测带都出现明显的红线 注意: ①检测带弱染色也视为阳性结果。 ②阳性结果可能在1-2分钟内可见。 | 阳性 | 2.只有控制带出现红线 | 阴性 | 3.控制带和检测带均未出现红线 | 无效 |
【常见问题解析】 问题 | 可能原因 | 解决方法 | 信号不明显 | ①缓冲液问题 ②试纸条过期 ③试纸条存放条件不当 ④阳性信号过强 | ①更换缓冲液 ②试纸条保质期为6个月 ③试纸条密封干燥避光保存(2-8℃) ④稀释样品 | 假阳性 | ①器皿或缓冲液污染 ②探针浓度过低 | ①更换新的器皿 ②选择合适的探针浓度 |
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