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产品信息 >> 核酸相关 >> 吸附柱法核酸提取试剂盒;
酵母总RNA提取试剂盒

产品介绍

试剂盒适用于从酵母中提取高纯度RNA。本试剂盒采用独特的试剂配方和特别制造的固相吸附介质。在试剂配方中避免使用苯酚、氯仿等有毒有害化学物质,对操作人员、实验环境无毒害影响。在产品独有的缓冲液体系的作用下,酵母RNA从菌体中快速释放,吸附于高性能的固相基质,洗脱后即可获得高纯度核糖核酸。产品具有操作快速简便、提取的核糖核酸纯度高、得率高等优点。

存储和稳定性

试剂盒储存在环境温度-40℃~40℃,相对湿度不大于75%,无腐蚀性气体的避光处。

本品保质期为36 个月。

包装清单

产品编号

产品名称

包装

1

溶液I(悬浮液)

10 ml

2

溶液II(裂解液)

10 ml

3

溶液III (稀释液)

30 mL

4

溶液Ⅳ(洗涤液1)

12mL(用前加入18ml的无水乙醇)

5

溶液(洗涤液2)

12mL(用前加入18ml的无水乙醇)

6

溶液Ⅵ(洗脱液)

10mL

7

纯化柱

50个

8

废液收集管

50个

9

说明书

1份

使用前准备

准备好所有必须的试剂和仪器,仔细阅读说明书。

每瓶溶液Ⅳ和Ⅴ在首次使用前按瓶子标签标示量加入无水乙醇并摇匀。

每个离心柱的最大可吸附约100μg RNA。

全部操作都在室温进行。

操作步骤

1. 在合适的培养基,合适的温度中过夜培养酵母菌。第二天,按1:50接种并培养至OD600达0.6‐1.0。这可能只需要几小时。

2. 取1ml 以上培养物,14,000 x g离心2分钟。

3. 将沉淀重悬在100ul溶液I中。

可选用:溶液I中加入β-巯基乙醇至终浓度为0.1%。含β-巯基乙醇的溶液I 4℃可保存1个月,过期请重新添加。

4. 30℃孵育15‐30分钟直到溶液看起来清亮。

5. 加入75ul溶液II,轻轻混合。

6. 加入350ul溶液III颠倒混匀,在小型离心机中最高速离心10分钟。

7. 用移液枪将上清转移到一支新离心管中。

8. 向澄清裂解液中加入200ul无水乙醇,用移液枪吸放3‐4次以混合。将此混合物转移到离心柱中。12,000‐14,000 x g离心1分钟。

9. 向离心柱中加入500ul溶液IV (确认已加入乙醇),12,000‐14,000 x g离心1分钟,清空收集管。

10. 加入500 ul溶液Ⅴ(确认已加入乙醇),离心12,000‐14,000 x g,2分钟。

11.将离心柱取出并放入新的1.5ml离心管中。向柱中加入溶液Ⅵ40~60μl,静置2~3 min。最高转速(12000g或13000rpm以上)离心1min。RNA即从离心柱上洗脱并收集在离心管中。盖好盛有RNA的洗脱管,存于‐70℃。

说明书:酵母总RNA提取试剂盒说明书

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