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产品信息 >> 核酸相关 >> 吸附柱法核酸提取试剂盒;
病毒核酸提取试剂盒

【产品名称】核酸提取或纯化试剂

【包装规格】50次/盒,100次/盒

【预期用途】用于核酸的提取、富集、纯化等步骤。其处理后的产物用于研究检测使用。

【检验原理】本试剂盒提供了一种简单、快速、高效的从全血、组织匀浆液、拭子,以及血清、 血浆、肺泡灌洗液等无细胞体液中提取DNA/RNA的方法。独特的缓冲体系使裂解液中的核酸高效特异地结合在硅胶质离心吸附柱上,获得的核酸纯度高,质量稳定,不含蛋白、核酸酶和其他杂质,可适用于各种常规操作,包括PCR、荧光定量PCR等实验。

【主要组成成分】

                 规格

组分

50 次/盒

100 次/盒

规格

数量

规格

数量

离心柱

50个/包

1包

50个/包

2包

收集管

50个/包

1包

50个/包

2包

裂解缓冲液LS

15ml

1瓶

30ml

1瓶

漂洗缓冲液SWB1

12ml(用前加18ml无水乙醇)

1瓶

24ml(用前加36ml无水乙醇)

1瓶

漂洗缓冲液SWB2

12ml(用前加18ml无水乙醇)

1瓶

24ml(用前加36ml无水乙醇)

1瓶

无RNA酶的水

10ml

1瓶

20ml

1瓶

蛋白酶K

1支(用前加1.25ml 无RNA酶的水)

1瓶

1支(用前加2.5ml无RNA酶的水)

1瓶

 【储存条件及有效期】

Proteinase K(固体)长期保存应置于2~8℃。如Proteinase K溶解后未立即用完,应按每次使用量分装成小份后-20℃保存备用。避免反复冻融造成酶活力下降。其余组分储存在环境温度-40℃~40℃,相对湿度不大于75%,无腐蚀性气体的避光处。

有效期:24 个月。

【适用仪器】小型高速离心机,水浴锅。

样本要求】适用的样本有:液体样本(包括血清、血浆、淋巴液、脑脊液、 尿液、痰液等呼吸道样本、漱口水、细胞培养上清液及其他临床液体样本)、拭子、粪便。取得样本后,应尽快提取。如不能及时处理,应妥善保存。

【检验方法】

使用前准备:

1、阅读说明书,熟悉操作方法。

自备试剂耗材:生理盐水、无水乙醇、异丙醇、合适规格的离心管。

2、首次使用前,分别向溶液SWB1和SWB2瓶中按要求加入无水乙醇,摇匀后标记备用。

3、使用前请检查裂解缓冲液LS和漂洗缓冲液SWB1是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将裂解缓冲液于56℃水浴重新溶解。

4、盒中试剂如不慎溅到皮肤、粘膜时,立即用大量清水冲洗干净。

5、离心柱、离心管为一次性产品。

6、操作均室温进行。

操作步骤:

1、样本的处理:

1.1 液体样本(血清、血浆、淋巴液、脑脊液、尿液、痰液等呼吸道样本、漱口水、细胞培养上清液等,样本黏稠时用适量生理盐水稀释后取样):先向1.5ml离心管中加入20 μL蛋白酶K,再加入样本 200ul(不足 200μl时用生理盐水补足200μl),然后加入200ul裂解液LS,漩涡混匀15sec。37℃温育 15min。至步骤“2”。

1.2 拭子:湿拭子样本充分震荡混匀后取200 μL进行提取。干拭子,用1~3ml生理盐水洗涤。向1.5ml离心管中加入20 μL蛋白酶K。再加入拭子洗涤液200ul,然后加入200ul裂解液LS,漩涡混匀 15sec。37℃温育 15min。 至步骤“2”。

1.3 粪便:取粪便(多于100mg即可,100mg体积约为100μl)于离心管中,加入3~6 倍体积的生理盐水,漩涡剧烈混匀30sec,12000×g离心3min。先向1.5ml离心管中加入20 μL蛋白酶K,再加入离心后上清液200ul,然后加入200ul裂解液LS,漩涡混匀 15sec。37℃温育 15min。至步骤“2”。

2、加入 200ul 异丙醇,混匀仪震荡5分钟。

注:如果没有异丙醇可用相同体积的无水乙醇代替,但异丙醇效果更好。

3、将步骤2所得溶液加入到吸附柱中。12,000 rpm(~13,400xg)离心1分钟,倒掉收集 管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。

3、向吸附柱中加入500 μL漂洗缓冲液SWN1,12,000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。

4、向吸附柱中加入500 μL漂洗缓冲液SWB2,12,000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。

5、12,000 rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温2分钟,晾干。

6、将吸附柱置于收集管中,向吸附柱膜的中间部位悬空加入40-60 μL无RNA酶的水, 室温放置2分钟,12,000 rpm离心1分钟,收集核酸溶液。置于-70℃长期保存。

    说明书:病毒核酸提取试剂盒

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